luc报告基因法原理
2024-06-16
来源:要发发教育
luc报告基因法原理
Luc报告基因法的原理是利用荧光素酶(Luc)催化荧光素(luciferin)发光,通过检测发光强度来检测荧光素酶的活性,从而反映基因的表达水平。
荧光素酶可以催化luciferin氧化oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出生物荧光(bioluminescence)。荧光素酶是能够催化不同底物氧化发光的一类酶,哺乳细胞无内源性荧光素酶。最常用的荧光素酶有细菌荧光素酶、萤火虫荧光素酶和Renilla荧光素酶。萤火虫荧光素酶灵敏度高,检测线性范围宽达7~8个数量级,是最常用于哺乳细胞的报道基因,用荧光比色计即可检测酶活性,因而适用于高通量筛选。
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