酶联免疫法酶联免疫法

发布网友 发布时间:2024-09-15 09:35

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酶联免疫吸附剂测定法,简称酶联免疫法(ELISA法),是一种通过抗体与酶复合物结合并显色来检测目标物质的技术。其核心步骤包括血液凝集、血清提取、酶复合物稀释、加入样本和对照,以及严格的质量控制。在孵育一小时后,进行洗涤、添加底物并避光反应,最后读取数值以判断结果。


基本原理是利用固相载体将抗原或抗体固定,同时将抗原或抗体与酶结合形成酶标记物。在测定过程中,样本中的受检物质与固相载体上的标记物发生反应,形成抗原抗体复合物。通过洗涤分离,剩余的酶量与受检物质量成比例。加入酶反应底物后,其量与受检物质的量相关,颜色深浅可反映物质的浓度,从而实现定性或定量分析。由于酶催化效率高,ELISA法具有很高的灵敏度。


此法广泛应用于抗原和抗体的测定,其基本试剂包括:固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体以及酶作用的底物。根据实验需求和样本特性,可设计出多种类型的检测方法,灵活适应不同的实验条件。




扩展资料

1971年瑞典学者Engvail和Perlmann,荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法,即酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA) 。ELISA现在已成为目前分析化学领域中的前沿课题 ,它是一种特殊的试剂分析方法,是在免疫酶技术( immunoenzymatic techniques ) 的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术 。

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